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有氧呼吸作用不可避免地會產生活性氧(ROS),在健康細胞中,活性氧的發生速度可控。 在氧化壓力條件下,ROS 的產生顯著增加,導致膜脂質、 蛋白質和核酸的損傷,這些生物分子的氧化損傷與各種病理事件有關,包括: 動脈粥樣硬化、癌化、缺血再灌流損傷和神經退行性疾病 ROS, 氧化壓力, 抗氧化, DNA損傷, 過氧化物,  8-OHdG, TBARS

ROS 和氧化壓力分析試劑-Assays for ROS and oxidative stress


有氧呼吸作用不可避免地會產生活性氧(ROS),在健康細胞中,活性氧的發生速度可控。 在氧化壓力條件下,ROS 的產生顯著增加,導致膜脂質、 蛋白質和核酸的損傷,這些生物分子的氧化損傷與各種病理事件有關,包括: 動脈粥樣硬化、癌化、缺血再灌流損傷和神經退行性疾病


活性氧物質 (Reactive oxygen species (ROS)
)

活性氧物質 (ROS) 是含氧的活性化學物質。 它們包括過氧化物 (peroxides)、超氧化物 (superoxide)、羥基自由基 (hydroxyl radicals)、單一態氧 (singlet oxygen)和α-氧 (alpha-oxygen)。活細胞中的 ROS 很容易用螢光染料來測定,例如: 使用 DCFDA。


Assay Readout Assay kits
DCFDA – cellular reactive oxygen species Flow cytometry, plate reader ab113851
Cellular superoxides Microscope, flow cytometry ab139477
Cellular ROS/Superoxide Microscope, flow cytometry ab139476
Cellular reactive oxygen species Plate reader ab186027, ab186028, ab186029
Cellular ROS/RNS Microscope ab139473
Mitochondrial hydroxyl radical Microscope, plate reader ab219931
Mitochondrial superoxide Microscope, plate reader ab219943
Hydrogen peroxide Microscope, plate reader ab138874, ab138886, ab102500



DNA/RNA 損傷/脂質過氧化/蛋白質羰基化/硝化 (DNA/RNA damage, lipid peroxidation, and protein oxidation/nitration)

氧化壓力除了可以藉由直接檢測活性氧物質來測量之外,亦可透過檢測 DNA/RNA 損傷、脂質過氧化和蛋白質氧化/硝化等方式間接測量。這些氧化應激標誌物比活性氧物質來的更持久。


DNA/RNA 損傷 (DNA/RNA damage)

有幾種類型的 DNA/RNA 損傷可以作為氧化壓力標記進行測量。 8-羥基脫氧鳥苷 (8-OHdG) 可能是最常用的氧化壓力 DNA 損傷標記物。 彗星檢測 (Comet assay)、脫嘌呤/脫嘧啶位點檢測 (apurinic/apyrimidinic sites)和醛誘導損傷檢測(aldehyde-induced damage) 可用作不太直接的 DNA 損傷測量。

脂質過氧化 (Lipid peroxidation)

丙二醛 (MDA) 是最常用的氧化壓力脂質標誌物。 它是通過多不飽和脂肪酸的過氧化作用形成的,通常使用 TBARS 測定法進行定量。 TBARS 檢測並不完全特定於 MDA,因為其他醛也會通過檢測產生訊號,但是,TBARS 檢測通常比使用 HPLC 測量 MDA 更方便。 MDA 的競爭性 ELISA 檢測也可用。

其他脂質過氧化標誌物包括 4-HNA、8-異前列烷 (8-isoprostane)、脂質氫過氧化物和氧化的低密度脂蛋白 (LDL)。

蛋白質羰基化/硝化 (Protein oxidation / nitration)

蛋白質的氧化損傷可以採取蛋白質羰基化和蛋白質硝化(3-硝基酪氨酸; 3-nitrotyrosines)的形式。 活性氧還可以引起晚期糖基化終產物 (AGE) 和晚期氧化蛋白產物 (AOPP) 的形成。 所有這些標記都可以通過標準測定法進行測量。


Assay Readout Assay kits
8-OHdG Plate reader ab201734
Lipid hydroperoxide (LPO) Plate reader ab133085
Lipid peroxidation (MDA) Plate reader ab118970
Protein carbonyl content Plate reader ab126287
DNA damage – apurinic/apyrimidinic sites Plate reader ab211154
Oxidized proteins Western blot ab178020



抗氧化劑 (Antioxidants)

抗氧化酶和其他氧化還原分子可以抵消導致氧化損傷的 ROS。 用作氧化壓力標記物的抗氧化劑分為三類:小分子、酶和蛋白質(如:白蛋白)。

目前存在多種測定方法來測量樣品的總抗氧化能力 (total antioxidant capacity),包括小分子和蛋白質抗氧化能力。 最常見的總抗氧化能力測定之一是 Trolox 等效抗氧化能力測定 (Trolox equivalent antioxidant capacity assay ;TEAC)。 氧自由基抗氧化能力 (oxygen radical antioxidant capacity; ORAC) 測定是另一種常見的氧化壓力測定,它通過測量抗氧化劑減少 ROS 對螢光染料的淬滅的能力來測量抗氧化能力。

還可以在特定分析物的水平上測量抗氧化活性。 例如,通過查看 GSH 和 GSSG 的相對水平。 穀胱甘肽 (GSH) 被認為是內源性抗氧化劑中最豐富的分子,以及其氧化形式為 GSSG。

可以根據氧化壓力水平測量抗氧化酶(例如: GST 和超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase; SOD))的活性水平。



Assay Readout Assay kits
Total antioxidant capacity: copper-based Plate reader ab65329
Total antioxidant capacity - FRAP assay (Ferric Reducing Antioxidant Power Assay Plate reader ab234626
Ascorbic acid Plate reader ab65656
NAD/NADH Plate reader ab65348, ab176723
NADP/NADPH Plate reader ab65349, ab176724
GSH/GSSG ratio Plate reader ab138881, ab205811
Thiol Plate reader ab112158, ab219272
Intracellular glutathione (GSH) Flow cytometry, plate reader ab112132
GST Plate reader ab65325, ab65326
Superoxide dismutase Plate reader ab65354
Glutathione reductase Plate reader ab83461
Xanthine oxidase Plate reader ab102522
Glutathione peroxidase Plate reader ab102530
Aconitase Plate reader ab109712
Catalase Plate reader ab118184, ab83464
Thioredoxin reductase Plate reader ab83463
NQO1 Plate reader ab184867
Peroxidase Plate reader ab155895
Oxidative stress defense cocktail (catalase, SOD1, TRX, smActin) Western blot ab179843


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發佈者 發佈時間 Feb 08, 2023 瀏覽次數 1894
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