Western blot 疑難雜症大解惑
我明明就按照步驟做,怎麼壓不出來?
Band 怎麼怪怪的? Today is not my day (T^T) 明明就按照 protocol 做為什麼就是做不好?
又要meeting了 data 出不來怎麼辦?誰來救救我QQ
您是否有遇到 western blot 怎麼壓都壓不出來的煩惱?
你妳你的心聲我們都聽到了!
昶安 Western blot 疑難雜症大解惑為您指點迷津,切勿錯過!
照膠問題
解決方法 | ||
抗體凝集 (Antibody aggregate) | ||
黑色凝聚點點 |
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轉漬膜乾燥 (Dried membrane) | ||
Band 不規則、破碎 |
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背景值過高 (High background) | ||
Membrane 邊邊黑色 |
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Band 中有泡泡 (Bubbles) | ||
Band 中間有泡泡、斷裂 |
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轉漬槽溫度過高/過熱 (Overheating) | ||
Band 不直,像毛毛蟲 |
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電壓不穩定 (Unstable power supply) | ||
Band 不直,像毛毛蟲或 W 形狀 |
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抗體濃度太高 (High antibody concentration) | ||
Band過粗、過曝、膜燒掉 |
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檢體蛋白量太高 (High protein amount) | ||
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Blocking 不當 (Inappropriate blocking condition) | ||
背景出現一條一條刮痕、點點狀 |
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Band 長短不一 (Inconsistent band size) | ||
Band 長短不一 |
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背景值光暗不一 (Inconsistent background) | ||
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雜 band 很多 (Multiple nonspecific bands) | ||
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Band 燒掉 | ||
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Band 糊掉 (Smear) | ||
Band 拖尾,呈現 smear 狀 |
(拖尾狀況一般來說是因為犧牲時檢體保存不當所導致,建議動物實驗收集檢體時務必盡快冷凍,或置於液態氮中,避免蛋白酶引發的蛋白降解作用) |
小編為您統整 western blot 的疑難雜症,希望能夠為您解惑
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發佈者
發佈時間 Dec 22, 2021
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