協助您快速篩選細胞表面標記的研究利器 — LEGENDScreen™

BioLegend 的 LegendScreen™系列產品，以凍乾粉的形式將各種螢光抗體分配在96孔板中，協助研究人員能快速篩選與偵測目標細胞表面上的各種不同分子表現。

BioLegend 昶安獨家代理

為什麼選擇 LegendScreen™？

1.可以大量篩選不同的表面標記

應用人類細胞可以選擇LEGENDScreen™ Human PE Kit (Cat. No. 700011)，內含354種細胞表面標記抗體與10種同型對照抗體。可以應用來篩選人細胞株或初代細胞，如週邊血液淋巴球、骨髓細胞及各種組織來源的細胞。

LEGENDScreen™ Mouse PE Kit (Cat. No. 700009) 試劑組，內含253種細胞表面標記抗體，及11種同型對照抗體。可以廣泛應用在小鼠細胞株或初代細胞，如脾臟細胞、骨髓細胞、各種組織來源的細胞等。

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2. 實驗操作步驟簡易且快速。

3. 篩選盤中提供已標定螢光的各種抗體且不需再額外測試抗體使用濃度。

4. 套組中含整個實驗所需的試劑耗材:細胞染色緩衝液、固定緩衝液及盤式封膜。

關於應用LEGENDScreen™ 的文獻分享

研究重要發現

• CSF1R+Ly6C+FLT3+CD11c- ‘‘R2’’ 細胞是樹突細胞（dendritic cells, DCs）的前驅細胞，非源自於單核細胞。
• 可以藉由CD45RB與FLT3表現來區分DCs與單核細胞。
• Lyz2+ DC前驅細胞 (pro-DC3s)可以分化為DC3s。
• DC3是由Ly6C+ monocyte-DC progenitors分化而來的樹突細胞獨立支系。

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研究目的

我們已了解傳統樹突細胞(Conventional dendritic cells, cDCs)是抗原呈現細胞之一，在調控適應性免疫反應中扮演重要的角色。然而我們對於cDCs的各種亞群與發展起源，仍不完全理解，特別是DC2支系和最近在人體中發現的DC3s支系的表現型，與單核細胞表型有重疊無法完全區分。

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研究策略與發現

使用 LEGENDScreen™ 比較樹突細胞和單核細胞支系的表面標記，發現所有樹突細胞譜系之FLT3和CD45RB表現量會持續表達，因此可藉此兩種標記區分樹突細胞與單核細胞(圖一)。

圖一、LEGENDScreen^TM幫助釐清不同細胞族群的表面標記。(A) FLT3+ Ly6C+ DC前驅細胞與FLT3- Ly6C+ monocytes的圈選策略，以(B) LEGENDScreen^TM分析細胞表面標記。(C) FLT3+ Ly6C+ DC前驅細胞與FLT3- Ly6C+ monocytes表面的CD45RB與CD16/32表達量。

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藉由各種螢光報導基因的轉殖小鼠動物模式、單細胞RNA定序及細胞移植等實驗，例如藉由Ms4a3TdT小鼠與Ms4a3Cre-RosaTdT小鼠體內的granulocyte-monocyte progenitors (GMPs) and monocytes會帶有Ms4a3-tdTomato螢光(圖二), 以Lyz2Cre-RosaTdT小鼠模式則可以區分帶有螢光的monocyte與macrophage，確認小鼠CD16/32+ CD172a+ DC3支系，與DC2有不同的分化路徑。而人類體內也存在這些與齧齒類動物相對應的樹突細胞次群、分化途徑及譜系。Liu等人的研究結果顯示，DC3是樹突細胞支系之一，其表現型與單核細胞及DC2相關，但卻具有其獨立的分化途徑。

圖二、以螢光報導基因動物模式探討細胞譜系與發育。(A) Ms4a3^TdT/+小鼠之骨髓、週邊血液及脾臟中R1, R2及R3 細胞的流式圈選策略; Lin (CD3e, CD19, NK1.1, Ly6G, TER-119, CD45RA, c-Kit)。(B) Ms4a3^TdT/+小鼠各組織中的Ms4a3-tdTomato表達量。(C) Ms4a3^Cre-Rosa^TdT小鼠中各種細胞的tdTomato標定比例。

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總結

LEGENDScreenTM試劑組中包含百種以上的螢光抗體，可快速篩選目標細胞族群的表面標記，幫助定義新穎細胞族群的表面分子表現，也能藉由細胞特有的表面標記進行進一步目標細胞純化與富集，以利針對目標細胞有更深入的研究。

參考文獻

Liu et al., 2023, Immunity 56, 1761–177

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