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為什麼應該將死/活細胞指示劑包含在您流式配色組合中? 為什麼應該將死/活細胞指示劑包含在您流式配色組合中?

為什麼應該將死/活細胞指示劑包含在您流式配色組合中?

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對於任何一個在實驗室工作的人來說,成功的實驗無疑是一件會讓研究工作者雀躍一整天的事。雖然成功的數據不一定刊登在發表論文上,或者實驗得到負面的結果,這些數據絕對是完成論文或專案的基石。因此數據的正確性是非常重要的。大家都知道樣本的品質會直接反映在數據的品質上,流式技術也與任何其他技術一樣,確保有良好的樣品前處理是非常重要的,同時我們也可以利用專門的工具來監測死細胞和組織碎片的數量。

某些細胞類型(例如,bone marrow resident plasma cells與mouse intestinal lamina propia cells)比起其他種類的細胞更敏感,在長時間的操作或繁瑣的實驗步驟,都可能會影響樣本的活性。此外,由於死亡和凋亡的細胞可以非特異性地與抗體結合,藉由圈選正確的細胞群體,以排除這些來自狀況不佳或死亡的細胞訊號式非常重要的起始步驟。特別是分析微量或稀少的細胞族群時,這一點更為重要,因為即使很小的變化也會對您最後取得的數據有重大的影響。

死/活細胞染劑通常透過與健康細胞中無法直接接觸到的分子結合來發揮作用。當細胞死亡導致細胞膜通透性改變時,這些分子就會暴露出來。例如,常見的死/活細胞染劑7-AAD和Propidium Iodine可以嵌入DNA中。其他染劑例如Zombie Dyes則是透過與胺基(存在於各種蛋白中)發生反應。在健康的細胞中,它們只能與細胞表面的胺基結合;面對垂死的細胞,這些染劑也可以與所有死細胞內的胺基發生反應,導致螢光強度增加,因而可以藉由螢光強度區別死細胞與活細胞。

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發佈者 發佈時間 Oct 16, 2023 瀏覽次數 54
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