神奇剪刀CRISPR / Cas9? Abcam基因剔除細胞株FAQ
基因的神奇剪刀: CRISPR
CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated protein 9) 是一種革命性的基因編輯技術，它利用細菌天然的防禦機制來進行基因組的修改。
這項技術在過去幾年中引起了廣泛的關注和應用。
CRISPR序列是細菌中存在的一段特殊DNA序列，其中包含了先前細菌曾經攻擊過的病毒的片段，Cas9蛋白則是一種具有切割DNA能力的酶，利用CRISPR序列和Cas9蛋白組合，形成一個能夠辨識和切割DNA的複合體。
使用CRISPR/Cas9進行基因編輯的過程通常包括以下步驟：
- 設計目標序列：研究人員首先選擇一個特定的DNA序列作為目標，希望對其進行修改或剔除。
- CRISPR組裝：將CRISPR序列與Cas9蛋白結合形成一個複合體。
- DNA辨識：CRISPR複合體會辨識和結合到目標DNA序列上。
- DNA切割：Cas9蛋白具有切割雙股DNA的能力，一旦CRISPR複合體與目標DNA序列結合，Cas9就會切割DNA，形成一個雙股斷裂。
- DNA修復：當DNA被切割後，細胞會啟動自身的DNA修復機制。
CRISPR/Cas9 技術的優點在於其高效性、準確性和相對較低的成本，目前已被廣泛應用於基礎研究、疾病模型建立、新藥開發等領域，對於基於基因研究和生物學領域產生了深遠的影響。
以下是CRISPR/Cas9技術的一些應用：
- 基因功能研究：CRISPR/Cas9可以用於剔除或修改特定基因，進而研究其功能和影響。研究人員可以通過觀察基因被編輯後的效果，了解該基因在生物體內的作用機制。
- 疾病模型建立：CRISPR/Cas9可以用於創建動物模型或細胞模型，模擬人類疾病的發生和發展。通過對特定基因進行編輯，研究人員可以觀察其對疾病的影響，並開展相應的疾病治療研究。
- 基因治療：CRISPR/Cas9被視為一種有潛力的基因治療工具。它可以用於修復或替換患者體內的缺陷基因，以治療某些遺傳性疾病。
- 農業改良：CRISPR/Cas9可以應用於作物基因組的編輯，以改善作物的抗病性、產量和品質，並減少對農藥和化肥的依賴。
- 生物醫學研究：CRISPR/Cas9可以用於研究疾病的發病機制、藥物研發以及探索人體基因組的複雜性。它可以幫助科學家更深入地了解基因與疾病之間的關聯。
儘管CRISPR/Cas9技術帶來了許多潛在的應用，但仍然存在一些挑戰和倫理考慮，例如：技術的準確性和副作用仍需要更多的研究和優化，以確保安全性和效果。此外，基因編輯的應用也引起了倫理和社會問題的關注，需要制定相應的法律和道德指導原則來指導其應用。
Abcam基因剔除細胞株: Knock-out (KO) cell lines
憑藉強大的 CRISPR / Cas9 基因編輯技術 ，Abcam的基因剔除細胞株(Knock-out Cell Line)經過嚴格的實驗驗證，可幫助研究人員對細胞基因型和表型之間的關聯進行探討，可以大幅節省時間，加快研究進度。
- 常見問題 FAQ
基因剔除(KO)細胞株是如何生成的？
Abcam利用CRISPR/Cas9基因編輯技術開發一系列剔除特定基因的癌細胞株。每株基因剔除細胞皆經過Sanger定序法驗證基因剔除效果
是否對細胞株進行黴漿菌(mycoplasma)測定?
Abcam交由第三方獨立檢驗單位Bionique進行把關，也會定期進行庫存抽查。
收到細胞後應該如何保存？
如果不打算馬上解凍細胞，應立即放置液態氮中保存。
是否可以使用自己的WT細胞株進行對照?
建議使用abcam隨訂購KO Cell Line 免費附贈的WT細胞株來作為對照。
Abcam的基因剔除細胞的biological safety level (BSL) 是多少？
根據不同的KO cell lines分級成BSL1和BSL2。
BSL1：A549, HCT116, HEPG2, 與MCF7細胞株；BSL2：EK-293T 與 HeLa細胞株。
這些基因剔除細胞株的 passage number是多少?
所有的基因剔除細胞株都少於20，任何相關資訊歡迎洽詢昶安生技產品專員。
這些基因剔除細胞包含哪些種類?
細胞種類涵蓋廣泛，如：A375, A-431, A-549, Caco-2, HCT116, HeLa, HepG2, HEK-293T, Jurkat, K-562, LnCaP, MCF7, PC-3, Raji, RAW 264.7, SH-SY5Y, SW480, THP-1, U-2 OS, U-87 MG等。
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相關文獻參考:
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Doudna, J. A., & Charpentier, E. (2014). The new frontier of genome engineering with CRISPR-Cas9. Science, 346(6213), 1258096.
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Zhang, F., Wen, Y., & Guo, X. (2014). CRISPR/Cas9 for genome editing: progress, implications and challenges. Human molecular genetics, 23(R1), R40-R46.
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