開學新手大補帖
昶安開學季—基礎實驗新手指南
昶安為您準備基礎實驗新手大補帖，讓實驗室新手們可以更加地得心應手!!
內容包含六大基礎實驗：
1. 細胞活力分析 Cell Viability assay
細胞活力是指一個細胞群體中健康的活性細胞所占的比例，細胞的活力可藉由檢測持續進行中的代謝活動和酵素活性等細胞生理活動來評估。多種測試細胞活力的試劑，包括CCK-8 , Resazurin, TMRE, Calcein violet,和 ATP luminescence 等。
粒線體膜電位高低可以反應細胞的活力狀態，因此可以利用會在粒線體中累積的染劑來識別活細胞。此外，粒線體膜電位喪失與染劑不染色通常用來檢測細胞凋亡。
2. 西方墨點法 Western Blot (WB)
Western Blot是生物化學技術，用於檢測蛋白質。透過電泳分離和抗體結合，可揭示蛋白質在生物樣本中的存在和量。在科研中，揭示細胞活動及疾病機制方面扮演關鍵角色。
原理： 利用電泳根據蛋白質大小分離於凝膠中。
轉漬： 將蛋白質轉移到膜上，固定在特定位置。
抗體結合： 使用抗體辨識目標蛋白質。
檢測： 化學反應產生訊號，表現蛋白質位置。
分析： 量化蛋白質，針對蛋白質的表現進行後續分析。
3. 氧化壓力 Oxidative stress
正常細胞中僅會在體內產生少量活性氧物質 (Reactive oxygen species; ROS) ，並且可以被體內的抗氧化物質中和，當發炎反應發生時，細胞會釋放出 ROS ，如超氧游離基（superoxide anion; O2-）與過氧化氫（hydrogen peroxide; H2O2），正常情況下， ROS 充當細胞的信號分子，調節細胞生長、細胞與其他細胞的粘附、分化、衰老和細胞凋亡，一但氧化壓力的平衡被破壞後，即會造成蛋白質、DNA 和脂質等物質的破壞，進而造成疾病的發生。
氧化壓力除了直接檢測活性氧物質來測量之外，亦可透過檢測抗氧化劑 (Antioxidants) 、 DNA/RNA 損傷(DNA/RNA damage)、脂質過氧化 (Lipid peroxidation) 和蛋白質羰基化/硝化 (Protein oxidation /nitration) 等方式間接測量，這些氧化應激標誌物比活性氧物質來的更持久。
4. 樣本萃取與定量 Sample extract and quantification
製備好的樣本是實驗成功的重要因素，昶安提供研究者在破細胞、萃取、定量與相關蛋白酶抑制劑，讓您製備高品質且穩定的樣本。
5. 酵素免疫分析法 Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
酵素連結免疫吸附法 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)，又稱酵素免疫分析 (enzyme immunoassay, EIA)，是一種靈敏、特異性高且廣泛應用於生化學和醫學研究中的分子生物學分析技術。其原理為在96孔盤上，利用抗原及抗體間的專一性鍵結的原理，s使用體驗酵素標記的抗體或抗原檢測樣品中的目標蛋白結合，定量樣本中蛋白的濃度。
6. 免疫組織化學染色法 Immunohistochemistry (IHC)
IHC代表免疫組織化學（Immunohistochemistry）。免疫組織化學是一種在組織切片中使用抗體來檢測特定蛋白質的方法。這種技術結合了組織學和免疫學，可以用來研究組織中不同細胞類型的分布以及這些細胞中的特定蛋白質表達。
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