細胞凋亡 apoptosis,Annexin V、Caspase 3/7、JC-1 和 TUNEL assay kits等多種染劑與試劑盒
細胞凋亡 (Apoptosis) 是程序性細胞死亡 (Programmed cell death) 的一個過程,在生物體內是一重要的生理代謝功能,與成長和老化的過程具有高度的關聯性。在整個細胞凋亡的過程中,包含了:細胞發泡 (Blebbing)、细胞皱缩 (Cell shrinkage)、核裂斷 (Nuclear fragmentation)、染色質固縮 (Chromatin condensation)、DNA碎裂 (DNA fragmentation) 以及mRNA 降解 (mRNA decay)。
在上述細胞凋亡過程中,細胞主要會經歷4個因素的改變,最終走向凋亡,分別為:(1) 細胞膜組成移位 (Phosphatidylserine translocate)、(2) 凋亡蛋白活化 (Caspase 3/7)、(3) 粒腺體膜電位去極化 (Mitochondria depolarization) 以及 (4) DNA 的斷裂
因此,在科研實驗中,可以利用不同階段間的差異性來判別細胞凋亡的程度。
(1)細胞膜磷脂絲胺酸組成移位 Phosphatidylserine (PS) translocation
Annexin V 是用於分辨凋亡細胞 (apoptotic cell) 常見的染劑,在鈣離子 (Ca2+) 作為輔因子的作用下,與細胞膜上的陰離子 - phospholipid phosphatidylserine (PS) 具有高度親和力。在一般健康的細胞 (normal cell) 中, PS 位於脂質雙層膜的內側。當細胞老化進入凋亡時,細胞膜結構會率先改變,進而造成 PS 移位 (translocation) 的發生,外翻至脂質雙層膜的外側。PS 的移位主要會誘導巨噬細胞遷移,將其吞噬 (phagocytosis)。
在科研實驗中,則可藉由 Annexin V 與 PS 高親和力的特性,將染劑接上熒光進行染色分析,區分出一般細胞和凋亡細胞。
螢光 |
貨號 |
APC | 640920 |
APC | 601410 |
Biotin | 640904 |
FITC | 640906 |
FITC | 600300 |
Pacific Blue | 640918 |
PE | 640908 |
PE | 601420 |
PE-CY7 | 640950 |
PerCP/Cy5.5 | 640936 |
AF647 | 640912 |
APC-FIRE750 | 640953 |
BV421 | 640924 |
BV510 | 640937 |
PE/Dazzle 594 | 640956 |
(2)凋亡蛋白活化 (Caspase 3/7)
Caspase 蛋白是由 cysteine-aspartic acid 組成的一群蛋白,在生物體重參與了多重的代謝作用。其中, caspase 3 和 caspase 7 主要的生理功能為調節細胞的凋亡。研究指出這群蛋白在生物體內的最主要的生理作用為參與細胞凋亡的起始過程。在細胞凋亡的整個程序中, caspase 這個家族的蛋白又可以被細分為 2種:開始蛋白 (initiator) 以及效應蛋白 (effector)。Caspase 8 和 caspase 9 為常見的開始蛋白;而 caspase 3 和 caspase 7 則是效應蛋白,誘導細胞蛋白的分解,啟動細胞凋亡的程序。Caspase 3 和 caspase 7 的辨識位置落在 aspartic acid residue 處,從而透過分裂 aspartate 的位置來啟動蛋白斷裂的產生。
Assay Kit
產品 |
貨號 |
Caspase 3/7 Staining Kit (Far Red) | ab270785 |
Caspase 3/7 Assay Kit (Magic Red) | ab270771 |
Caspase-3/7 Fluorescence Assay Kit | 10009135 |
Caspase-3 Fluorometric Assay Kit | K105 |
CaspGLOW™ Fluorescein Active Caspase-3 Staining Kit | K183 |
CaspGLOW™ Green Active Caspase-3/7 Staining Kit | K2030 |
抗體
靶點 | 應用 | 反應物種 | 貨號 |
Caspase 3 | ICC/IF, WB | Hu | ab13847 |
FC, ICC/IF, IHC-P, IP, WB | Hu | ab32351 | |
IHC-P, IP, WB | Mu, Rat, Hu | ab184787 | |
Cleavage Caspase 3 | WB | Hu | ab2302 |
ICC/IF, WB | Hu | ab32042 | |
Pro caspase 3 | Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB | Hu | ab32150 |
FC, ICC/IF, IHC-P, WB | Mu, Hu | ab32499 | |
Caspase 7 | FC, ICC/IF, IHC-P, IP, WB | Hu | ab32522 |
FC, ICC/IF, IHC-P | Hu | ab69540 | |
Cleavage Caspase 7 | IP, WB | Mu, Rat, Hu | ab256469 |
(3)粒腺體膜電位去極化 (Mitochondria depolarization)
在細胞凋亡的過程中,粒腺體功能異常也是重要的指標之一。粒腺體的生理功能主要是將碳水化合物轉換成ATP,供給細胞能量來源以及電子傳遞功能等。而粒腺體透過維持膜電位的恆定才能鞏固其生理功能的正常作用反應。因此,粒腺體去極化 (depolarization) 的發生,最適用於判斷細胞功能的異常的發生。此時,細胞內 ATP 和 ADP 的比例會大幅度的降低,粒腺體基質 (matrix) 中也會出現大量鈣離子堆積的情況發生,進而造成粒腺體生理功能異常,最終走向細胞凋亡。
產品 |
貨號 |
JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | 10009172 |
JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Flow Cytometry Assay Kit | 701560 |
MitoSpy™ Green FM | 424805 |
MitoSpy™ Orange CMTMRos | 424803 |
MitoSpy™ Red CMXRos | 424801 |
MitoSpy™ NIR DiIC1(5) | 424807 |
JC-1 - Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | ab113850 |
Mitochondrial PT Pore Assay Kit | 601430 |
TMRE Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | 701310 |
(4)DNA 的斷裂 (Damage of DNA)
產品 |
貨號 |
EZClick™ TUNEL – in situ DNA Fragmentation/Apoptosis Assay Kit | K191 |
TUNEL Assay Kit - BrdU-Red | ab66110 |
TUNEL Assay Kit - HRP-DAB | ab206386 |
TUNEL Assay Kit - FITC | ab66108 |
TUNEL Assay Kit - Edu-Orange | ab252888 |
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DAPI | 422801 |
Propidium Iodide Solution | 421301 |
Helix NP™ Blue | 425305 |
Helix NP™ Green | 425303 |
Helix NP™ NIR | 425301 |
DRAQ7 | 424001 |
DRAQ5 | 424101 |
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