BioLegend’s Mini ELISA Plate Reader™

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目前全世界都在積極的了解SARS-CoV-2 的機制,BioLegend 提供合適的資源,使客戶可以用來研究宿主細胞產生的免疫反應。研發的第一步可以透過識別參與的免疫細胞,如 T 細胞和 B 細胞。 接下來可以透過細胞進行徹底的表徵和表型的分析分析,這都能夠幫助潛在探索區分亞群的新的生物標誌物,有效的為新的治療方法開闢道路。 SARS-CoV-2/COVID-19/新的生物標誌物

新冠病毒 (SARS-CoV-2) 特定細胞和生物標誌物

BioLegend 提供一系列探索新冠病毒的研究工具

目前全世界都在積極的了解SARS-CoV-2 的機制,BioLegend 提供多元的資源,使客戶可以用來研究宿主細胞產生的免疫反應。研發的第一步可透過識別參與的免疫細胞,如 T 細胞和 B 細胞。 接著可以透過細胞進行徹底的表徵和表型的分析,這些都能夠潛的探索及區分亞群的新生物標誌物,有效的為新的治療方法開闢道路。

BioLegend TotalSeq™ 揭露獨特免疫細胞亞群

Multi-Omics Resolves a Sharp Disease-State Shift between Mild and Moderate COVID-19


Yapeng Su的細胞出版物中,首先收集健康和 COVID-19 患者的血漿和 PBMC 樣本,並且根據世界衛生組織的規範的順序中,將病患分類為輕度、中度或重度。此研究關於數百種代謝物和分泌蛋白,但我們主要提出此文獻中,使用了超過190種TotalSeq™ oligonucleotide-conjugated 抗體,去進行細胞多組學分析,並發現到關鍵的免疫細胞亞群。文獻中發現一些有趣的現象,患者從輕度狀態演變到中度狀態時,在免疫細胞分析中產生很大的差異。整篇文章多次提到 T 細胞耗竭的情況。 T 細胞衰竭描述了一種功能失調的狀態,其中 T 細胞逐漸失去細胞毒性或抗病毒功能。這些細胞會因為持續暴露於抗原(例如癌症或慢性病毒感染)而變得精疲力竭。從表型上看來,這些細胞可能會改變它們的轉錄和細胞因子,並上調 PD-1 等耗竭標誌物。 知道了這些資訊後,便可以推測出一些確定的亞群。

T 細胞:TCR 分析揭露出兩個與疾病嚴重程度相關的 CD8+ T 細胞亞群:細胞毒性T細胞(cytotoxic T cell)和記憶型 T 細胞 (memory T cell) 表型。此研究中表示在從輕度到中度狀態的進展過程中,細胞可能會從記憶表型轉變為大量增殖T細胞。此外,如 LAG3、TIGIT 和 CD279 等細胞標誌物的表達,出現了細胞耗竭和增殖的 CD8+ T 細胞群。另一方面, CD4+ T 細胞中,接露出兩個細胞亞群:其中一個亞群表現出 PRF1 和 GNLY 的細胞毒性轉錄物,另一個亞群,則出現細胞耗盡和增殖標記物以及 Th1 特徵表型(類似於上述所提到的 T 細胞的 CD8+ 亞群)。

B 細胞:中度/重度 COVID-19 患者與與健康/輕度病例相比,中度/重度病例的 B 細胞表達更多的激活標誌物,並且擴增出更多的抗體分泌細胞(ASC) 。

單核細胞:中度患者表現出較低水平的非經典 (CD14 low CD16 high) 單核細胞,否而是 S100 high HLA-DR low 單核細胞增加。作者從理論上分析,後一組單核細胞可能表現出功能失調的傾向並導致促炎環境。

自然殺傷 (NK) 細胞:中度患者的 NK 細胞變得更具細胞毒性,CD56 和 CD127 轉錄物表現減少,但 PRF1、GZMB 和 CD69 轉錄物表現增加。

疾病狀態從輕度到中度的轉變,與這些罕見細胞群的代謝和細胞因子變化互相吻合。這些結果同時表明, COVID-19的中度患者會是介入治療的最佳潛在時間。

用於 SARS-CoV-2 研究的其他試劑

除了上述獨特的產品以外,BioLegend 同時也提供許多 SARS-CoV-2 多種免疫測定,包括:MojoSort™ 用於基於磁珠的細胞分離;用於生物測定的 重組蛋白、細胞因子和生長因子;和LEGENDScreen™,它允許通過流式細胞術篩選數百個細胞表面標誌物。儘管免疫分析的方法不同,但 LEGENDScreen™ 和TotalSeq™-C Human Universal Cocktail V1.0都能夠檢測多種表面蛋白。Su等人在論文中使用了後一種試劑,其中包含 130 種標記物和 7 種同種型對照抗體的即用型混合物提供。

為了使研究取得進展,必須為研究人員、臨床醫生和科學家提供一套通用的工具。BioLegend 將繼續開發這些新型試劑,以便研究人員能夠充分了解每個細胞在 SARS-CoV-2 免疫中的作用。

用於 COVID-19 研究的 LEGENDplex™ 免疫測定

隨著研究單位爭分奪秒的想要了解 SARS-CoV-2 的免疫反應,多重細胞因子分析的分析具有相當的重要性,比以往任何時候都更需要。LEGENDplex™ 由微珠所組成的免疫測定,並應用於流式細胞術的量測上,可以測量出多種可溶性的生物樣品分析物。可經由觀看BioLegend 提供的 LEGENDplex™ 專家 Jason Lehmann 博士介紹該測定方式的基本原理,並了解如何活用此工具。


哪些樣本類型適合 LEGENDplex™ 分析?

LEGENDplex™ 針對血清和細胞上清液樣品類型進行了驗證。同時確認血漿和組織萃取液都可以作為檢測的樣品,但有一些注意事項。
以下是BioLegend提供的建議:
(1)應使用抗凝劑(如 EDTA、肝素、檸檬酸鹽)採集血漿,並在採血完30 分鐘內進行離心。
(2)如果無法立即進行檢測,請在低溫下分裝並儲存樣品於 ≤ -20°C 。
(3)避免多次 (>2) 冷凍/解凍循環,並且在使用冷凍樣品時,建議將樣品完全解凍、充分混合並離心以去除顆粒。

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發佈者 發佈時間 Jun 02, 2021 瀏覽次數 257
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